專利代理工作中,最具有挑戰(zhàn)性的工作之一就是對于專利創(chuàng)造性的答復(fù)。在創(chuàng)造性評述過程中,“容易想到”是本領(lǐng)域技術(shù)人員最常給出的評述方式之一,也是令申請人和代理人最頭疼的意見陳述的問題之一。小編在剛接觸到OA答復(fù)的時候,面對審查意見,也不由發(fā)出感嘆:“說的有道理,我無力反駁?!?/span>
但是,事實真的如此嗎?下面讓我們結(jié)合具體案例進行分析。
案例介紹
本發(fā)明原權(quán)利要求1的撰寫如下:
1、一種慢病毒保存液,其特征在于:所述的慢病毒保存液包括:HEPES、蔗糖、NaCl以及MgCl2;所述的HEPES的濃度為30-70mM,所述的NaCl的濃度為1-20mM,所述的MgCl2的濃度為5-50mM,所述的蔗糖的含量為1-20%。
第一次審核意見通知書中指出:
對比文件1公開了:一種慢病毒溶解緩沖液,其組分為10mM HEPES + 100mM NaCl + 4%蔗糖 + 0.01% Tween80 + 2mM MgCl2,pH 7.5。
審查員認為對比文件1與本發(fā)明的區(qū)別在于:具有不同的組分配比。本發(fā)明實際解決的技術(shù)問題是:提高病毒穩(wěn)定性。
對于上述區(qū)別技術(shù)特征,審查員認為對比文件2公開了:保持慢病毒在-80℃短期穩(wěn)定性最有效的緩沖液是①50%HEPES中的10%蔗糖、②PBS中的20mM MgCl2、③50mM HEPES中的5%蔗糖-20 mM MgCl2、④50mM HEPES??梢姡瑢Ρ任募?給出了包括HEPES、MgCl2和蔗糖濃度的技術(shù)啟示。而對于NaCl的濃度,也是根據(jù)病毒滴度等指標,并通過常規(guī)技術(shù)調(diào)整容易想到的。
因此,在對比文件1的基礎(chǔ)上結(jié)合對比文件2及本領(lǐng)域的公知常識,得到該權(quán)利要求的技術(shù)方案,對本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見的,該權(quán)利要求不具備突出的實質(zhì)性特點和顯著的進步。
這么一看審查意見貌似很有道理,但如果認真對對比文件進行閱讀,我們就會發(fā)現(xiàn)本發(fā)明和對比文件的區(qū)別所在。
案例分析
首先來探討一下對比文件1記載的技術(shù)效果
對比文件1公開了一種慢病毒溶解緩沖液(HSTM),成分為:10mM HEPES + 100mM NaCl + 4%蔗糖 + 0.01% Tween80 + 2mM MgCl2。該慢病毒溶解緩沖液以?80℃/37℃反復(fù)凍融3次后的感染滴度下降了約29.73%(圖1);該慢病毒溶解緩沖液在4℃下保存48小時后感染滴度下降了約86.48%(圖2)。
圖1
圖2
由此可見,本申請具有更好的技術(shù)效果。但由于對比文件1與本申請所用實驗方法不同,為使對比結(jié)果更明確,參照對比文件1制備HSTM緩沖液,并參照本申請說明書進行穩(wěn)定性檢測,測定結(jié)果如下:
(1)HSTM緩沖液在?80℃/37℃反復(fù)凍融的條件下,經(jīng)過6個凍融循環(huán),相對感染滴度為20.34%。
(2)HSTM緩沖液在4℃保存15天后,相對感染滴度為1.25%。
由以上結(jié)果可知,采用本申請所述的慢病毒保存液,可以更長期、更穩(wěn)定地保存慢病毒載體、維持慢病毒載體的生物學(xué)活性;使用過程中允許反復(fù)凍融次數(shù)更多。
現(xiàn)在已經(jīng)證明本發(fā)明相比于最接近的現(xiàn)有技術(shù)具有明確的區(qū)別特征,并且該區(qū)別特征能夠解決技術(shù)問題。接下來就要盡全力證明技術(shù)方案的獲得是困難的,并不是顯而易見的。小編的觀點就是只要有區(qū)別,就一定要據(jù)理力爭。
對比文件2沒有給出技術(shù)啟示
對比文件2的穩(wěn)定性研究中,將LV顆粒用不同的緩沖液在4°C下懸浮過夜。將最終產(chǎn)品冷凍,在?80°C下儲存,然后解凍進行緩沖研究。將不同緩沖液中的LV在4°C或室溫下孵育24小時,并在三個不同的時間點(孵育0小時、6小時和24小時后)測定穩(wěn)定性。
穩(wěn)定性的測試結(jié)果如圖3所示:
圖3
(1)在?80°C條件下(圖3G-F)維持LV短期穩(wěn)定性(0小時)的最佳緩沖液作用效果為:10%蔗糖 + 50mM HEPES > 20mM MgCl2 + PBS > 50mM HEPES > 5%蔗糖 + 20mM MgCl2 + 50mM HEPES。
(2)在室溫孵育條件下(圖3G)保持穩(wěn)定性的最佳緩沖液是:50mM HEPES;20mM MgCl2 + PBS;20mM MgCl2 + 50mM HEPES,在孵育6小時后,分別保留68%、65%、77%的載體活性;在孵育24小時后載體活性分別僅為18%、27%、8%。
(3)在4°C孵育條件下(圖3F)保持穩(wěn)定性的最佳緩沖液是:PBS;5%蔗糖 + 50mM HEPES;5%蔗糖 + 20mM MgCl2 + 50mM HEPES,在孵育6小時后,分別保留67%、71%、82%的載體活性;在孵育24小時后載體活性分別僅為55%、50%、59%。
結(jié)果(2)和結(jié)果(3)表明:經(jīng)上述緩沖液處理過的慢性病毒的滴度從最初的0小時滴定點到24小時滴定點顯著降低。
綜上所述:對比文件2達到的技術(shù)效果為:50mM HEPES;10%蔗糖 + 50mM HEPES;20mM MgCl2 + PBS;5%蔗糖 + 20mM MgCl2 + 50mM HEPES雖然能夠在-80°C儲存條件下保持慢病毒載體的短期穩(wěn)定性(0小時)。而PBS;50mM HEPES;5%蔗糖 + 50mM HEPES;10%蔗糖 + 50mM HEPES;20mM MgCl2 + HEPES;20mM MgCl2 + PBS;5%蔗糖+2mM MgCl2 + 50mM HEPES;5%蔗糖 + 20mM MgCl2 + 50mM HEPES均不能長期、穩(wěn)定地保存慢病毒載體。
而本申請的技術(shù)方案為:HEPES、MgCl2、NaCl、蔗糖共同組成慢病毒保存液;本申請的達到的技術(shù)效果為:采用本申請所述的慢病毒保存液,可以長期、穩(wěn)定地保存慢病毒載體、維持慢病毒載體的生物學(xué)活性;還可以在使用過程中反復(fù)凍融。
由此可見,對比文件2與本申請達到的技術(shù)效果不同,并且對比文件2的實驗結(jié)果與本申請所達到的技術(shù)效果相反,可見本申請各成分之間共同發(fā)揮作用取得了預(yù)料不到的技術(shù)效果,克服了技術(shù)偏見。因此對比文件2不能給出本申請技術(shù)啟示。
公知常識沒有給出技術(shù)啟示
本申請請求保護的慢病毒保存液為:30-70mM HEPES、1-20%蔗糖、1-20mM NaCl以及5-50mM MgCl2??梢钥闯?,本申請的慢病毒保存液與對比文件1的對比例1公開的慢病毒溶解緩沖相比,缺少Tween80這一成分。
對比文件1中明確記載“Tween80也稱為聚山梨酯80,是一種藥用輔料,能夠防止蛋白或病毒聚集”。表明Tween80具有慢病毒保存作用。
因此,按照本領(lǐng)域技術(shù)人員的公知常識,缺少Tween80這一成分會使慢病毒溶解緩沖液保存慢病毒的效果變差。然而本申請公開的慢病毒保存液與比文件1的對比例1公開的慢病毒溶解緩沖液相比,雖然缺少Tween80這一成分,但可以更長期、更穩(wěn)定地保存慢病毒載體、維持慢病毒載體的生物學(xué)活性,并且使用過程中允許反復(fù)凍融次數(shù)更多,這種結(jié)果是本領(lǐng)域技術(shù)人員預(yù)料不到的效果。因此,公知常識對于本申請沒有給出技術(shù)啟示。
總結(jié)
在創(chuàng)造性的評述中,在審查意見中會找到最接近本發(fā)明的現(xiàn)有技術(shù),然后論證本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)的區(qū)別特征,以及這些區(qū)別特征達到的技術(shù)效果,最后說這些區(qū)別特征的結(jié)合是容易想到的,權(quán)利要求的技術(shù)方案是顯而易見的,所以沒有創(chuàng)造性。對于創(chuàng)造性的答復(fù),我們可以掌握以下技巧:
1、首先要羅列與對比文件的區(qū)別技術(shù)特征,確定實際解決的技術(shù)問題,對比文件的技術(shù)效果可以直接對比或通過補充實驗進行對比。
2、從對比文件中尋找“反向教導(dǎo)”的表述,進一步證明,通過對比文件不容易推斷出本發(fā)明的技術(shù)方案。
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