本發(fā)明的權(quán)利要求1如下:
一種NK細胞凍存液,所述的NK細胞凍存液由Cryostor? CS10和人血清白蛋白組成;所述的Cryostor?CS10和人血清白蛋白的體積比為3∶1。
對比文件1(簡稱D1)公開了:
一種免疫細胞凍存液,其由CryoStor? CS10、人血白蛋白注射液和氯化鈉注射液組成。
對于如此小的差異,還能夠拿到授權(quán)嗎?秉承著“只要有區(qū)別就會有希望”的信念,開啟我們的答復(fù)之旅。
首先,從技術(shù)效果入手:
從本發(fā)明表1中記載的數(shù)據(jù)可以看出:D0(凍存前)本發(fā)明實施例1凍存液的平均細胞活率為79.12%;D1(復(fù)蘇當(dāng)天)實施例1凍存液的平均細胞活率為77.71%。培養(yǎng)至D4時,實施例1凍存液活率細胞活率恢復(fù)到70.40%,相比于復(fù)蘇當(dāng)天降幅僅為7.31%。
而對比文件1公開的數(shù)據(jù)中顯示:
凍存液3為對比文件1中凍存效果最好的凍存液。D0(復(fù)蘇當(dāng)天)凍存液3的活細胞比例為97.1%。培養(yǎng)至D3時,凍存液3的活細胞比例為85.3%,相比于復(fù)蘇當(dāng)天降幅為11.8%。
由以上結(jié)果可知,本發(fā)明提供的NK細胞凍存液在D4時具有更小的降幅,能夠更好的維持細胞活率,凍存效果更好。
現(xiàn)在已經(jīng)證明本發(fā)明相比于最接近的現(xiàn)有技術(shù)具有明確的區(qū)別特征,并且該區(qū)別特征能夠解決技術(shù)問題。接下來就要證明技術(shù)方案的獲得并不是顯而易見的。
① 本發(fā)明對氯化鈉注射液進行省略
D1表1公開了不同配比的凍存液的成分配比:
并記載了上述凍存液的活細胞比例,結(jié)果如下:
凍存液1為CryoStor? CS10:人血白蛋白注射液=7:1;復(fù)蘇后4天時,活細胞比例相較于復(fù)蘇當(dāng)天下降了21.3%。
凍存液3為CryoStor? CS10:稀釋液=1:1;所述稀釋液人血白蛋白注射液和氯化鈉注射液按1:3的體積比混合。凍存液3復(fù)蘇后4天時活細胞比例相較于復(fù)蘇當(dāng)天下降了11.8%。
相較于凍存液3,凍存液1缺少了氯化鈉注射液這一組分。而凍存液1的凍存效果顯著下降。可以推測出,氯化鈉注射液具有一定的凍存功效。
由此可見,按照本領(lǐng)域技術(shù)人員的公知常識,缺少氯化鈉注射液這一組分會使凍存液的效果變差。因此,本領(lǐng)域技術(shù)人員不能夠通過D1對氯化鈉注射液進行省略。
② 現(xiàn)有技術(shù)中CryoStor? CS10和人血白蛋白注射液的組合凍存效果不佳
D1公開了凍存液1(CryoStor? CS10:人血白蛋白注射液=7:1)復(fù)蘇后4天時,活細胞比例相較于復(fù)蘇當(dāng)天下降了21.3%。由此可見,D1公開了:CryoStor? CS10和人血白蛋白注射液組合物的凍存效果不好。因此,本領(lǐng)域技術(shù)人員沒有動機,根據(jù)對比文件1中各成分濃度比例,調(diào)整CryoStor? CS10和人血清白蛋白的體積比,從而達到更好的凍存效果。
另外,D1的實驗結(jié)果與本發(fā)明的技術(shù)效果相反,可見CryoStor? CS10和人血清白蛋白在特定的比例下共同發(fā)揮作用取得了預(yù)料不到的技術(shù)效果,克服了技術(shù)偏見。以上結(jié)果是本領(lǐng)域技術(shù)人員在本申請公開前所無法預(yù)期的,因此本申請具有預(yù)料不到的技術(shù)效果。
綜上所述,本發(fā)明權(quán)利要求1具備創(chuàng)造性,符合專利法第22條第3款的規(guī)定。最終,本發(fā)明拿到了授權(quán)。
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